产品货号：
MT0080
中文名称：
BL21(DE3)感受态细胞
英文名称：
BL21(DE3) Competent Cells
产品规格：
100μl×10支
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
大肠杆菌经Ca离子处理后可摄取外源DNA(Plasmid、Phage DNA)，处于这种状态的细胞称作感受态细胞。在进行基因重组时，使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。制作基因文库、重组质粒体以及进行亚克隆实验时，特别是目的基因含量十分低的情况下时，使用高效的感受态细胞十分重要。BL21（DE3）感受态细胞主要应用于蛋白表达，使用pUC57质粒检测本感受态细胞，转化效率可达105～106。在-70℃下保存数月转化效率不发生明显降低。
使用方法：
1．取出感受态细胞，置于冰上5分钟，解冻。
2．向感受态细胞中加入1～20ng质粒DNA，轻弹离心管底部混匀，冰上放置30分钟。
3．置于42℃热激90s后，迅速置于冰上急冷2分钟。
4．向热激完毕的感受态细胞中，加入700μl经37℃预热的LB(或SOC)培养基(不含抗生素)，37℃振荡（225rpm）培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5．室温4000rpm离心5分钟，弃去700μl上清后，用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6．将平板置于37℃培养，12～14小时后可出现菌落。
注意事项：
1．感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。
2．pUC18 plasmid标准品（0.2ng/μl），含有氨苄青霉素抗性，作为阳性对照使用，每次转化5μl，可以得到约10～100个克隆。
3．该感受态细胞属于蛋白表达专用感受态细胞，从该感受态细胞中提取质粒效果不佳。实验时不要直接转入连接产物，请先将连接产物转入TOP10、JM109、DH5alpha等克隆感受态细胞后，提取质粒后再转入该感受态细胞。
保存条件：-70℃可保存一年。
相关搜索：BL21(DE3)感受态细胞，BL21(DE3) Competent Cells
使用方法：
1．取出感受态细胞，置于冰上5分钟，解冻。
2．向感受态细胞中加入1～20ng质粒DNA，轻弹离心管底部混匀，冰上放置30分钟。
3．置于42℃热激90s后，迅速置于冰上急冷2分钟。
4．向热激完毕的感受态细胞中，加入700μl经37℃预热的LB(或SOC)培养基(不含抗生素)，37℃振荡（225rpm）培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5．室温4000rpm离心5分钟，弃去700μl上清后，用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6．将平板置于37℃培养，12～14小时后可出现菌落。
注意事项：
1．感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。
2．pUC18 plasmid标准品（0.2ng/μl），含有氨苄青霉素抗性，作为阳性对照使用，每次转化5μl，可以得到约10～100个克隆。
3．该感受态细胞属于蛋白表达专用感受态细胞，从该感受态细胞中提取质粒效果不佳。实验时不要直接转入连接产物，请先将连接产物转入TOP10、JM109、DH5alpha等克隆感受态细胞后，提取质粒后再转入该感受态细胞。
保存条件：-70℃可保存一年。
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